孕期维生素A缺乏导致胎鼠肛门直肠发育畸形的实验研究

摘要

目的观察维生素A缺乏（vitamin A,VA）对胎鼠肛门直肠畸形（anorectal malformations,ARM）的发生和末端直肠肠壁内神经系统（enteric nervous system,ENS）发育的影响。方法 SD成年雌性大鼠60只,随机分为三组（于孕前2周开始每组喂以不同剂量的VA饮食至孕期结束）:①VAD组（n=20只）:喂以VA缺乏饲料;②正常对照组（作为阴性对照组,n=20只）:喂以普通饲料;③ETU组（即乙烯硫脲组,作为阳性对照组,n=20只）:喂以普通饲料。于妊娠第10天,ETU组经胃管注入1%的乙烯硫脲（ethylenethiourea,ETU）（125 mg/kg）;于妊娠第20天,所有孕鼠行剖宫术取胎鼠。观察活胎鼠ARM发生率以及用免疫组织化学方法检测胎鼠末端直肠PGP 9.5和S-100蛋白的表达水平。结果 （1）血清VA水平:经VA缺乏饲料喂养2周后VAD组的血清VA浓度明显低于正常对照组（P=0.0310）和ETU组（P=0.0401）;（2）ARM发生率:VAD组和ETU组的胎鼠ARM发生率分别为64.5%（20/31）、45.9%（61/133）,两组之间差异无统计学意义（P＞0.05）;正常对照组未发现ARM;（3）免疫组织化学结果:①在有肛门胎鼠末端直肠中,PGP 9.5和S-100在VAD组中的表达明显低于ETU组（PGP 9.5的P值=0.0156、S-100的P值=0.0105）和正常对照组（PGP9.5的P值=0.0091、S-100的P值=0.0024）,而ETU组和正常对照组两组之间表达差异无统计学意义（P＞0.05）;②在无肛畸形胎鼠末端直肠中,PGP 9.5和S-100在VAD组中的表达明显低于ETU组（P＜0.0001）;VAD组和ETU组的无肛胎鼠末端直肠中的表达均显著低于各自的有肛门胎鼠组（VAD组:PGP9.5和S-100的P值均＜0.0001;ETU组:PGP 9.5的P值=0.0203、S-100的P值=0.0122）。结论孕期VA缺乏会导致胎鼠ARM的形成,胎鼠末端直肠ENS发育程度与其ARM有关。