早期补充维生素A改善孕期维生素A缺乏对肠道粘膜免疫细胞的影响

摘要

目的：维生素A(VA)是调节肠道粘膜天然免疫屏障功能的重要微量营养素之一,前期研究发现孕期维生素A缺乏(VAD)导致生后肠道粘膜免疫细胞数量减少,因此本研究通过对孕期维生素A缺乏的(母)仔鼠不同时间点给予维生素A补充,以期寻找维生素A补充改善肠道粘膜免疫功能的最佳时间窗.方法：根据维生素A每日推荐量的5倍剂量,分别对生后1天(VAS1)、28天(VAS2)的孕期维生素A缺乏仔鼠灌胃补充维生素A,连续补充7天,断乳后饲以VA正常饲料至6周龄.维生素A孕期、哺乳期和断乳后期均正常的老鼠作为对照组.处死前12h,每组随机选取一半仔鼠给予腹腔注射LPS(3mg/kg),取血、脾、肠系膜淋巴结、Peyer's结和小肠.高效液相色谱测血浆中VA浓度,流式细胞技术检测脾、肠系膜淋巴结和Peyer's结淋巴细胞亚群(T细胞、B细胞和树突状细胞)和小肠上皮细胞间淋巴细胞(IEL)的表型变化.结果:各补充组老鼠血清维生素A水平均高于1.05mmol/L，与维生素A正常对照组(VAN)无差异。在无LPS感染状态下，两个补充组脾中的CD4+CD8+T细胞数量均显著低于VAN组(P<0.001)，而LPS处理12h后，两补充组脾CD4+CD8+T细胞数量与VAN、VAD组均没有统计学差异。VAS1组LPS感染(VAS1+LPS)后脾CD4+CD25+T细胞数量可达到正常水平，与VAD组存在显著性差异。在LPS感染前后，VAS，组中肠系膜淋巴结日细胞数量与VAN组相同，均无显著差异，而VAS2组中LPS处理仍明显上调肠系膜淋巴结中B淋巴细胞的数量，与VAD组变化一致。VAS1组Peyer's结DC细胞数量在LPS感染前后与VAN组无差异，而VAS2组Peyer's结DC细胞数量在LPS感染前后与VAD组无显著差异。所有补充组的Peyer's结CD4+CD25+下细胞数量均显著低于正常水平。两个补充组LPS感染后CD8+IEL数量均可达到VAN组水平，而CD8+TCRgd+IEL在所有补充组中均显著低于VAN组和VAD组。结论:孕期维生素A缺乏的仔鼠生后早期进行VA补充均可显著提高血清中视黄醇水平，但只有生后1d补充可基本弥补孕期VA缺乏对脾及肠相关淋巴组织中淋巴细胞亚群数量的影响，提示生后早期补充VA是改善肠道粘膜免疫反应，维持免疫稳态的关键时间窗。