丹参酮ⅡA通过AK003290减轻H2O2诱导的原代小鼠心肌细胞焦亡

摘要

目的:探讨丹参酮Ⅱ A对过氧化氢(H2O2)诱导的原代小鼠心肌细胞焦亡的影响及可能分子机制.方法:分离培养原代小鼠心肌细胞,制备H2O2诱导的心肌细胞损伤模型,给予丹参酮Ⅱ A处理,分为对照(control)组、H2O2组(H2O2处理12 h)及丹参酮ⅡA组(20、40和60 μmolo/L的丹参酮Ⅱ A预处理12 h+H2O2处理12 h);siRNA转染原代小鼠心肌细胞,real-time PCR确认干扰效率,分为对照(control)组、H2O2组(H2O2处理12 h)、丹参酮Ⅱ A组(40 μmol/L的丹参酮ⅡA预处理12 h+H2O2处理12 h)和siAK003290+丹参酮ⅡA组(siAK003290转染+40 μmol/L的丹参酮ⅡA预处理12 h+H2O2处理12 h).CKK-8法测定细胞活力,Western blot检测细胞焦亡相关蛋白GSDMD和caspase-1表达,ELISA检测炎症因子白细胞介素1 β(IL-1β)和IL-18含量,real-time PCR检测AK003290表达.结果:与control组相比,H2O2组细胞活力显著降低(P＜0.01),焦亡相关蛋白GSDMD和caspase-1表达增高(P＜0.01),细胞上清IL-1β和IL-18含量显著增加(P＜0.01),AK003290表达显著降低(P＜0.01);与H2O2组相比,丹参酮ⅡA组细胞活力显著升高(P＜0.05),焦亡相关蛋白GSDMD和caspase-1表达降低(P＜0.05),细胞上清IL-1β和IL-18含量显著减少(P＜0.05),AK003290表达显著增多(P＜0.05);与丹参酮ⅡA组相比,siAK003290+丹参酮ⅡA组细胞活力显著降低(P＜0.05),焦亡相关蛋白GSDMD和caspase-1表达增高(P＜0.05),细胞上清IL-1β和IL-18含量显著增加(P＜0.05).结论:丹参酮ⅡA可减轻H2O2诱导的原代小鼠心肌细胞焦亡,其机制与上调AK003290的表达有关.