N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍诱发的vero细胞JNK/SAPK通路的激活

摘要

目的和方法:为了研究DNA损伤剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱发vero细胞非定标性突变发生的信号转导机制,我们观察了MNNG诱发vero细胞c-Jun NH2-terminal kinase/stress activated protein kinase(JNK/SAPK)通路激活的情况:分别用Western印迹法和固相激酶活性测定法检测JNK1磷酸化和JNKs激酶活性.结果:发现用0.2 μmol/L MNNG和1 mg/L放线菌素酮(CHM)分别处理vero细胞2.5 h和1 h后,都引起细胞抽提液中磷酸化JNK1的比例明显增高.同时通过测定JNKs的底物c-Jun的磷酸化程度,发现这两种处理也都可引起JNKs激酶活性显著增高(分别增高6.7和3.0倍).结论:证明0.2 μmol/L MNNG和1 mg/L CHM分别处理vero细胞2.5 h和1 h都可引起vero细胞内JNK/SAPK通路被激活.