hIL-2分泌肽序列在HepG2细胞中对hEndostatin表达和分泌差异的影响

摘要

目的:了解分泌肽序列在HepG2细胞中对人内皮抑素基因(hEndostatin)的cDNA表达和分泌差异的影响.方法: 构建不含hIL-2分泌肽序列的真核表达载体pBlast-hEndo质粒,转染人的HepG2细胞株,用RT-PCR的方法检测HepG2(pBlast-hIL2-hEndo), HepG2(pBlast-hEndo), HepG2(pBlast-Mcs)和HepG2中hEndostatin的mRNA表达水平,及制备4种细胞的总蛋白和收集各自的培养上清,进行Western blot分析蛋白表达和分泌的差异.结果:发现HepG2(pBlast-hIL2-hEndo)中hEndostatin的mRNA的水平显著高于HepG2(pBlast-hEndo).而仅在HepG2(pBlast-hIL-2-hEndo)的细胞总蛋白和上清,及HepG2(pBlast-hEndo)的细胞总蛋白中检测到hEndostatin表达,在其它各株细胞总蛋白及上清中,未检测到hEndostatin. 结论: hIL-2分泌肽序列能促进hEndostatin基因在HepG2细胞中表达及分泌.