脂多糖结合蛋白抑制肽的筛选和鉴定

摘要

目的:获得具有抑制脂多糖结合蛋白(LBP)致炎作用的可溶性多肽. 方法: 以LPS为目标分子,对噬菌体12肽库进行亲和筛选, 4轮筛选后,检测随机挑取的100个噬菌体克隆的结合活性和竞争抑制活性,将得到的可与LBP竞争性结合LPS的噬菌体克隆进行功能筛选,对获得的阳性克隆进行DNA序列测定,推导外源肽氨基酸序列,并与LBP序列比较,确定LBP致炎作用位点.固相法合成 LBP抑制性多肽,并检测其生物学活性. 结果: 16个噬菌体克隆可与LBP竞争性结合LPS,其中9个噬菌体克隆可显著抑制LBP增敏LPS的致炎作用.9个阳性克隆融合多肽的核心序列为WKXRKXFXKXXG,与LBP的91-102位氨基酸序列有明显同源性.化学合成的12肽WKVRKSFFKLQG-NH2具有显著的抑制LBP致炎功能的作用. 结论: 此12肽具有抑制LBP致炎功能的活性.