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氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞炎症因子表达

         

摘要

目的:探讨氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)对培养的人巨噬细胞表达巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor,TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)mRNA水平的影响。方法:28SC人巨噬细胞株用含有10%FBS的RPMI-1640培养基于37℃,5%的CO2中培养。以每孔1×104个细胞接种于6孔板中,每孔2mL,加入终浓度为150mg/L的Ox-LDL,不加Ox-LDL作为正常对照,分别为MIF、TNF-α、MCP-1和Control组,每组6个平衡孔,共同孵育24h收集细胞,重复三次实验。RT-PCR测定炎症因子mRNA水平。PCR扩增产物于1.2%琼脂糖凝胶电泳,Molecular Analyst软件进行吸光度溶积分析,计算目的基因/GAPDH灰度的比值进行半定量分析。以SPSS10.0软件进行统计学分析,所有数据均以均数±标准差表示,两组资料间的比较采用Student’s t检验。

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