VEGFsiRNA对肝癌SMMC 7721细胞株VEGF表达和增殖的抑制作用

摘要

目的:探讨VEGFsiRNA对肝癌SMMC 7721细胞株VEGF表达和增殖的抑制作用.方法:采用siRNA设计法则并用计算机辅助设计9条VEGFsiRNA序列,长度为19个核苷酸;体外构建9条VEGFsiRNA序列,通过脂质体介导转入肝癌SMMC 7721细胞株,培养72 h,采用CCK8试验分析VEGFsiRNA(25nmol/L)对细胞增殖的抑制效果,用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白水平,流式细胞仪检测细胞周期的改变.结果:VEGFsiRNA1-VEGFsiRNA 9序列对肝癌细胞的增殖有明显抑制作用,与脂质体对照组和空白对照组相比均有显著差异(P＜0.05);其中,VEGFsiR-NA 2、VEGFsiRNA 4、VEGFsiRNA 6、VEGFsiRNA 7、VEGFsiRNA 8、VEGFsiRNA 9对细胞增殖的抑制效果均强于反义寡核苷酸组.VEGFsiRNA1-VEGFsiRNA 9序列均能下调肝癌细胞VEGF蛋白的表达水平,以VEGFsiRNA 7和VEGFsiR-NA2的效果最强,抑制率分别为52.65%和50.43%.VEGFsiRNA将肝癌细胞阻滞在S期,但未引起细胞凋亡现象.结论:成功地设计和合成VEGFsiRNA.后者能有效地抑制肝癌细胞的增殖,降低VEGF蛋白的表达量.