大鼠胰岛微血管内皮细胞分离、纯化与培养的改进

摘要

目的:建立稳定可靠的大鼠胰岛微血管内皮细胞分离培养方法.方法:分离纯化大鼠胰岛后进行内皮细胞选择性培养,使用UEA-1包被的免疫磁珠对胰岛微血管内皮细胞进行纯化.免疫荧光法检测经典的内皮细胞标志物第Ⅷ因子相关抗原(vWF)和cD34的表达和吞噬Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-Ac-LDL)能力.结果:胰岛培养4-5 d后,可见内皮细胞从贴壁的胰岛内爬出,通过UEA-1包被的免疫磁珠筛选出胰岛微血管内皮细胞接种后24 h细胞开始贴壁.该细胞具有单层生长、接触抑制的特性.大鼠胰岛微血管内皮细胞表达vWF和CD34,可摄取Dil-Ac-LDL.结论:本研究方法是一种较为高效的分离、纯化和培养大鼠胰岛微血管内皮细胞的方法.