PCR-ACRS方法筛查CYP21基因P459H的突变位点

摘要

目的:研究21-羟化酶基因(CYP21)第10外显子P459H突变(CCC→CAC)在正常人群中的发生率.分析P459H是点突变还是基因多态.方法:设计特异性引物扩增CYP21基因3-10外显子,Pst I限制性内切酶消化验证PCR产物为特异性扩增,在此基础上,应用PCR结合扩增引进限制性酶切位点方法(PCR-ACRS)扩增首次PCR产物.Fsp I限制性内切酶酶切后用10%聚丙烯酰胺凝胶电泳筛查第10外显子P459H的发生率.结果:100例正常人CYP21基因第10外显子密码子459均为CCC,即均未出现P459H变异.结论:CYP21基因P459H为占突变排除基因多态的可能.另外PCR-ACRS县一种快速、可靠的的检测基因点突峦的有效效径,