微囊介导 VE－Cad 胞吞参与了 LPS 作用后血管通透性增高的形成

摘要

目的：观察脂多糖（ lipopolysaccharide，LPS）作用后微囊介导的血管内皮钙黏蛋白（ vascular endo－thelial cadherin，VE－Cad）胞吞，及其在血管通透性增高中的作用。方法：采用人血管内皮细胞株CRL－2922，以及免疫组化、免疫印迹、免疫共沉淀等技术方法，观察LPS处理后不同时点细胞质膜微囊重要结构蛋白小窝蛋白1（caveolin－1， Cav1）的蛋白表达和磷酸化，Cav1与VE－Cad的共沉淀和共定位，以及微囊抑制剂对LPS处理后Cav1与VE－Cad的共沉淀、VE－Cad质膜表达和单层细胞通透性的影响。结果：（1） LPS处理后Cav1蛋白表达无显著变化，但其Tyr14位点的磷酸化水平逐渐增高（P＜0．05），Cav1与VE－Cad的免疫共沉淀逐渐增多（P＜0．05），免疫组化激光共聚焦显微镜观察在4 h时可见明显的共定位；（2）细胞质膜微囊抑制剂非律平（5 mg／L）可以显著减少LPS处理4 h Cav1与VE－Cad的免疫共沉淀（P＜0．05），增强VE－Cad的质膜表达（P＜0．05），改善单层细胞通透性（P＜0．05）。结论：细胞质膜微囊介导VE－Cad胞吞参与了LPS作用后血管通透性增高的形成。