Mfn2在环孢素A诱导HeLa细胞生长停滞中的作用

摘要

目的:探讨环孢素A(TSA)对HeLa细胞中线粒体融合蛋白2(Mfn2)表达水平极其下游通路的影响.方法:运用不同浓度的TSA处理HeLa细胞,分别检测细胞增殖、细胞凋亡以及细胞的周期改变;Western blot检测Ras、p-Raf、Raf、p-ERK、ERK、p-Akt、Akt和Mfn2的蛋白水平;real-time PCR检测Mfn2 mRNA的表达水平;用免疫共沉淀法检测Mfn2与Ras结合的水平.将HeLa细胞过表达Mfn2后,观察上述指标的改变.结果:TSA对HeLa的抑制作用呈剂量依赖和时间依赖的特点.HeLa细胞经TSA处理后,Mfn2的mRNA和蛋白表达水平均显著增高,Mfn2与Ras的结合升高,Raf和ERK的磷酸化水平降低.过表达Mfn2抑制了Ras-Raf-ERK通路并诱导了HeLa细胞的生长阻滞,但对细胞的凋亡水平影响较小.结论:Mfn2参与了TSA诱导的HeLa细胞生长阻滞,其效应可能是通过抑制Ras-Raf-ERK通路实现的.