下调Wnt通路活性对非小细胞肺癌细胞株吉非替尼疗效的影响

摘要

目的探讨下调Wnt通路活性对吉非替尼抑制非小细胞肺癌细胞株增殖的影响及其潜在的作用机制。方法不同浓度吉非替尼处理PC9细胞株（吉非替尼敏感株）与PC9/AB2细胞株（吉非替尼耐药株）,细胞计数检测试剂盒（CCK8）检测两种细胞株的增殖情况。Western blot分别检测PC9与PC9/AB2细胞中Wnt信号通路相关蛋白的表达情况。双荧光素酶报告基因系统（TOP Flash）分别检测PC9和PC9/AB2细胞株Wnt通路的转录活性。采用B-catenin序列特异的siRNA抑制PC9/AB2中Wnt通路的转录活性后,用不同浓度吉非替尼处理,CCK8检测干预后细胞增殖情况。干扰后表皮生长因子受体及其下游通路的表达情况。结果不同浓度吉非替尼作用下,PC9/AB2细胞对吉非替尼的耐药性明显增高（P＜0.05）。PC9/AB2细胞Wnt通路相关蛋白的表达明显高于PC9,差异有统计学意义（t=24.590,P=0.000）。TOP Flash结果显示,PC9/AB2细胞株中Wnt通路的转录活性高于PC9细胞株,差异有统计学意义（t=4.983,P=0.008）。抑制Wnt通路后,与阴性对照组相比,干扰组细胞凋亡率增加,对药物敏感性增强（P＜0.05）。下调Wnt通路活性后p-ERK1/2的表达水平较阴性对照组明显降低,其他蛋白表达无明显差异。结论抑制Wnt通路活性可部分逆转非小细胞肺癌细胞对吉非替尼的耐药性。