糖皮质激素影响间充质干细胞成骨分化的实验研究

摘要

目的 探讨Notch信号通路在糖皮质激素影响间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化过程中的作用.方法 培养MSCs,给予糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)处理,计算凋亡率,分析细胞凋亡情况;通过real-time PCR方法,检测细胞内Notch信号通路靶基因Hes1和成骨相关基因(ALP,Col1agen1)mRNA的表达;通过Western blot方法检测Notch信号通路靶基因Hes1和成骨相关基因蛋白的表达;应用茜素红染色,检测细胞内成骨钙化作用.结果 GCs处理后,凋亡细胞增加[(80±5.789)vs对照组(60±7.132),P<0.05];MSCs成骨分化相关基因ALP、Collagen1mRNA和蛋白表达明显减低,与对照组相比,P<0.05;茜素红染色显示GCs组染色强度与对照组相比显著降低(P<0.05).同时,Notch信号通路靶基因Hes1表达明显降低(与对照组相比,P<0.05),Notch信号通路表达明显受到抑制.激活Notch信号通路,细胞凋亡百分率降低为72±2.169(与GCs组相比,P<0.05);成骨分化基因ALP、Collagen1mRNA和蛋白表达都较GCs组有所提高(P<0.05);茜素红染色显示GCs+JAG1组染色强度与GCs组相比明显提高(P<0.05).结论 GCs通过抑制Notch信号通路的表达,进而抑制MSCs的成骨分化.