外源性NGF对转基因CGRP干细胞移植治疗骨质疏松大鼠的影响

摘要

目的 研究外源性神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对转基因降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)骨髓干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗骨质疏松大鼠的影响.方法 构建CGRP基因表达载体,转染制备转基因CGRP-MSCs靶细胞;60只雌性SD大鼠骨质疏松模型随机均分为空白对照组(A组)、单纯MSCs移植治疗组(B组)、CGRP-MSCs移植治疗组(C组)、CGRP-MSCs+NGF移植组(D组).在治疗1w、2w、3w后,实时定量荧光PCR和Westernblot检测3个时间段每组大鼠股骨骨组织中CGRP基因和蛋白的相对表达水平,评价各组疗效.结果 与A组比较,3个时间点,C组和D组中CGRP表达水平均显著上调(P＜0.01);治疗1w后,C组和D组上调水平差异明显(P＜0.01),D组低于C组;治疗2w后,C组和D组之间仍保持显著差异(P＜0.05),D组仍低于C组;治疗3w后,C组和D组上调水平差异明显缩小,二者差异无统计学意义(P＞0.05).CGRP基因和蛋白相对表达水平在各组检测结果差异一致,同上.结论 在转基因CGRP-MSCs移植治疗骨质疏松大鼠中联合应用外源性NGF,无累计效应,并可能抑制大鼠股骨骨组织中CGRP的表达,表明外源NGF于转基因CGRP-MSCs移植治疗骨质疏松症中可能并无促进作用,至少在CGRP表达层面无促进作用,而单纯的转基因CGRP-MSCs移植治疗骨质疏松大鼠疗效优于联合应用外源性NGF治疗方案.