重组BMP-4对兔骨髓基质干细胞生物学行为的影响

摘要

目的应用原核细胞基因工程方法生产出有活性的骨形态发生蛋白-4(bone morphoge-netic protein-4,BMP-4),观察其对骨髓基质干细胞生物学行为的影响.方法利用RT-PCR技术,从成熟的人胎盘组织中扩增出长0.34kb编码人BMP-4成熟肽的基因序列,装入表达载体pET-22b(+),转化大肠杆菌BL-21菌株,并诱导目的蛋白表达,SDS-PAGE检测表达蛋白.获得的蛋白制品经小鼠异位成骨测活证实后,诱导培养的兔骨髓基质干细胞,观测细胞形态变化、碱性磷酸酶和骨钙素的含量.结果大肠杆菌中目的蛋白表达量达菌体蛋白的15%,该蛋白可诱导骨髓基质干细胞向成骨细胞分化,形成钙结节,碱性磷酸酶和骨钙素的含量也明显增加.结论大肠杆菌可表达出有活性的BMP-4,该蛋白可诱导骨髓基质干细胞向成骨细胞分化.