移植物转染反义细胞外信号调节激酶-2基因减轻慢性移植物血管病

摘要

目的研究转染反义ERK2基因对慢性移植物血管病的抑制作用及其机制。方法构建含有反义ERK2基因和带有LacZ基因的腺病毒载体。以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,制作大鼠腹主动脉移植模型。ERK2组接受转染反义ERK2基因的腹主动脉移植,LacZ组接受转染LacZ基因的腹主动脉移植,对照组接受不进行处理的腹主动脉移植。移植后60 d,取各组移植血管和血清样本,以2,3-二羟基丙醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）为内参照,计算ERK2条带灰度与GAPDH条带灰度的比值（ERK2/GAPDH,即为ERK2的相对表达强度）;测量移植血管内膜厚度（I）和中膜厚度（M）,计算I/（I+M）之百分比;检测移植血管平滑肌细胞（VSMC）的数目和分布;检测血清血小板源性生长因子-BB（PDGF-BB）的浓度。结果对照组、LacZ组和ERK2组ERK2/GAPDH的比值分别为1.21±0.15、1.02±0.06和0.47±0.09,后者显著低于前二者（P＜0.05）。对照组和LacZ组移植血管呈典型的移植物血管病表现,两组I/（I+M）比值分别为84.1%和79.9%;ERK2组移植血管呈移植动脉内膜炎表现,该组I/（I+M）比值为13.7%,显著低于前两组（P＜0.05）。对照组和LacZ组内膜增厚处散在分布大量VSMC,计数分别为（71.3±9.2）个和（76.4±11.3）个;ERK2组内膜处VSMC计数为（34.8±5.3）个,明显少于前两组（P＜0.05）。对照组和LacZ组受者血清PDGFBB浓度分别为（1075±70）pg/ml和（1200±25）pg/ml,ERK2组为（626±27）pg/ml,ERK2组明显低于对照组和LacZ组（P＜0.05）。结论转染反义ERK2基因可减轻慢性移植物血管病,并延缓其进展,其机制可能与VSMC增殖和迁移受到抑制以及PDGF BB表达下调有关。