转染人热休克蛋白70对同种异体移植心脏移植物血管病的影响

摘要

目的探讨经冠状动脉内灌注重组腺病毒载体介导HSP70（Ad．HSP70）转基因治疗对同种异体心脏移植物血管病的影响。方法以套管技术建立颈部异位异种心脏移植模型。基因转移组在体外经冠状动脉缓慢灌注含3．8×10^10VP／mlAd—HSP70的4℃HTK液，持续45min；空白载体组灌注含3．8×10^10VP／ml不携带基因腺病毒空白载体（Ad）的HTK液（B组）；对照组仅灌注无病毒的HTK液（A组）持续同样时间。术后1个月收集移植物组织做检测。组织内目的基因表达产物通过免疫分析、RT—PCR进行半定量分析，免疫组化染色进行定性和定位分析。结果RT—PCR证实，移植物内外源性HSP70基因转录，免疫组化检测证实Ad—HSPT0转染的移植物（C组）HsP70成功转到血管周围的心肌细胞和冠状动脉微血管，HSP70表达水平明显高于其他两组（P〈0．01）。HSP70过量表达减少NF—KB的活化及VCAM-1的表达，HSP70过量表达的移植物内炎症细胞浸润数明显减少，巨噬细胞和NK细胞浸润减少，移植物血管内皮损伤轻。结论经冠状动脉灌注重组腺病毒载体介导保护性自稳蛋白一人热休克蛋白70基因转移到心脏移植物是相当有效可行的，并可减轻移植物冠脉内皮损伤，预防移植物血管病。经冠状动脉灌注重组腺病毒载体介导基因转移在移植物内局部表达有潜力的治疗制剂，此方法具有广阔的临床应用前景。