米诺环素减轻大鼠循环死亡后供肝肝移植缺血再灌注损伤的研究

摘要

目的 研究米诺环素对大鼠循环死亡后肝移植缺血再灌注损伤（IRI）的作用及其分子机制。方法 采用"磁环法"建立大鼠心脏停跳后肝移植模型,供、受者均为雄性SD大鼠。分为假手术组（SHAM组）、肝移植组、米诺环素组（MIN组）、苍术苷（线粒体通透性转换孔开放剂）＋米诺环素组（ATR＋MIN组）,每组供、受鼠共24对。MIN组肝移植后经阴茎背静脉注射米诺环素（10 mg/kg）,ATR＋MIN组在MIN组基础上再注射苍术苷（2 mg/kg）。术后2、6、24 h检测线粒体通透性转换孔（mPTP）开放状态；免疫印迹法及免疫组织化学法检测含半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase3）和细胞色素c（cyt c）蛋白的表达；检测受鼠血清谷氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）的水平。受鼠肝组织行HE染色,观察病理学改变并计算Suzuki评分。计算各组受鼠存活率。结果 与肝移植组和ATR＋MIN组比较,术后2、6、24 hMIN组mPTP开放明显减少（P＆0.05）,组织中cyt c和caspase3蛋白水平、血清ALT和AST水平、肝组织损伤程度明显降低（P＆0.05）,术后30 d存活率升高（P＆0.05）；肝移植组和ATR＋MIN组之间各指标的差异,无统计学意义（P＆0.05）。结论 米诺环素可减轻大鼠循环死亡后供肝肝移植的IRI,其机制可能是通过抑制mPTP开放,阻止cyt c释放和caspase3激活以减轻肝细胞的凋亡所致,且这种作用可以被mPTP开放剂阻断。