川陈皮素经AKT/GSK3β/NF-κB通路抑制Kupffer细胞活化减轻大鼠原位肝移植后缺血再灌注损伤

摘要

目的:探讨川陈皮素(nobiletin)对大鼠原位肝移植后缺血再灌注损伤(IRI)的作用及机制.方法:提取大鼠Kupffer细胞(KCs),分为空白对照组、LPS组、LPS+川陈皮素组,ELISA检测炎症因子IL-1β、TNF-α和IL-6浓度,Western blot检测AKT/GSK3β/NF-κB通路蛋白的表达.动物实验中构建大鼠肝移植后缺血再灌注模型,分为假手术组(Sham组)、肝移植组(LT组)、LT+川陈皮素组.分别于再灌注3 h、6 h、12 h、24 h后获取各组外周血并检测血清转氨酶水平,ELISA检测血清炎症因子水平,获取肝脏组织,提取肝组织及KCs总蛋白,检测炎症因子、凋亡蛋白、AKT/GSK3β/NF-κB通路蛋白水平,HE染色检测肝脏组织病理改变,TUNEL检测肝细胞凋亡情况,流式检测各组CD68和CD86阳性KCs比例.结果:川陈皮素抑制LPS激活的KCs促炎因子IL-1β、TNF-α和IL-6的表达(P<0.05),促进抑炎因子IL-10的表达(P<0.05),同时川陈皮素抑制AKT/GSK3β/NF-κB通路磷酸化水平(P<0.05),动物实验中川陈皮素抑制AKT/GSK3β/NF-κB通路活性,LT+川陈皮素组肝脏损伤程度明显低于LT组(P<0.05),且LT+川陈皮素组肝细胞凋亡水平及M1型KCs比例均低于LT组(P<0.05).结论:川陈皮素通过AKT/GSK3β/NF-κB通路抑制KCs炎症水平,减轻大鼠肝移植后肝脏缺血再灌注损伤.