C57BL／6小鼠形觉剥夺性近视巩膜COLlσ2启动子区域CpG岛甲基化水平

摘要

目的研究C57BL／6小鼠形觉剥夺性近视形成和恢复期巩膜COLlα2 mRNA表达及其启动子区域CpG岛甲基化水平。方法实验研究。单眼形觉剥夺建立C57BL／6小鼠近视动物模型和恢复期动物模型，分别单眼遮盖4周（48只）和单眼遮盖4周恢复1周（24只），另外设立正常对照组小鼠36只。实验前后分别用红外偏心摄影验光仪测量小鼠眼球的屈光状态，OCT检测小鼠眼轴长度和玻璃体腔深度。RT—PCR检测巩膜COLlα2 mRNA表达水平；硫化测序聚合酶链式反应（BSP）检测C57BL／6小鼠巩膜COLlα2启动子区域CpG岛甲基化水平。同一小鼠的实验眼和对侧眼比较采用配对t检验，不同组间比较采用独立样本t检验。结果 形觉剥夺4周，实验眼相比对侧眼形成明显的相对近视（t=-2.64，P〈0．05），并伴有眼轴和玻璃体腔延长。形觉剥夺4周恢复1周后，相对近视和延长的眼轴和玻璃体腔长度都获得恢复。形觉剥夺4周后，实验眼和正常对照眼相比COLlcα2mRNA表达明显下降（t=3．05，P〈0．05），形觉剥夺4周恢复1周实验眼与正常对照眼相比差异无统计学意义。形觉剥夺4周，实验眼和对侧眼及正常对照眼COLlα2启动子区域CpG岛甲基化水平差异均无统计学意义。结论小鼠单眼形觉剥夺4周可诱导出相对近视，巩膜内COLlα2 mRNA表达明显下降，但该改变与其基因启动子区CpG岛的甲基化状态无关．