端粒酶RNA反义核酸联合其催化亚单位反义核酸对子宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用

摘要

目的探讨端粒酶RNA反义核酸(反义hTR)联合端粒酶RNA催化亚单位反义核酸(反义hTERT),对宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用及作用机理.方法实验分为空白对照、脂质体对照、正义hTR 、正义hTERT、反义hTR、反义hTERT及反义hTR+反义hTERT组.分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、PCR-端粒重复序列扩增(TRAP)-酶联免疫吸附实验(ELISA)、吖啶橙染色法、流式细胞术检测宫颈癌Hela细胞转染反义hTR和反义hTERT后细胞的增殖、端粒酶活性及细胞形态学、细胞凋亡和细胞周期阻滞的变化.结果宫颈癌Hela细胞转染端粒酶反义核酸后,出现明显的细胞增殖抑制、端粒酶活性下降、细胞凋亡形态学改变、细胞凋亡率升高及细胞周期阻滞.反义hTR、反义hTERT组与空白对照、脂质体对照及正义hTR、正义hTERT组比较,差异有统计学意义(P< 0.01) .Hela细胞转染反义核酸(0.2 μmol/L)3 d 后,反义hTR+反义hTERT组,细胞增殖抑制率、相对端粒酶活性(相对于空白对照组)、细胞凋亡率分别为69.3%、19.6%、28.6%,与反义hTR组和反义hTERT组比较,差异均有统计学意义( P< 0. 01),Q值分别为0.867、0.919、1.075.反义hTR+反义hTERT组 G0/G1期细胞比例增加.结论端粒酶反义核酸能通过特异性抑制端粒酶活性、诱导细胞凋亡及增强细胞周期阻滞等途径抑制宫颈癌Hela细胞生长,端粒酶反义hTERT和反义hTR联合应用有协同作用.