99Tcm-HYNIC-Annexin V的制备及其在健康小鼠体内的分布

摘要

目的制备人膜联蛋白V(Annexin V),应用联肼尼克酰胺(HYNIC)偶联后进行99Tcm标记,评价99Tcm-HYNIC-Annexin V在健康小鼠体内的分布.方法采用基因工程方法构建Annexin V的原核载体并诱导其表达,与自行合成的双功能螯合剂HYNIC偶联,并进行99Tcm标记.测定99Tcm-HYNIC-Annexin V的标记率、放化纯,并研究其在健康小鼠体内的生物分布特性.结果 Annexin V在大肠杆菌中获得稳定表达,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western Blotting检测,得到纯度较高的蛋白质.Annexin V经HYNIC偶联后,其99Tcm标记率可达90%左右,放化纯＞90%.小鼠体内分布结果表明,99Tcm-HYNIC-Annexin V血液清除迅速,主要从肾脏和肝脏排泄.结论Annexin V可在原核生物中稳定表达.其与HYNIC偶联后,99Tcm标记率和放化纯较高,方法简单,条件温和.