肿瘤坏死因子受体短肽配体的筛选

摘要

目的　利用噬菌体六肽库筛选肿瘤坏死因子 (TNF)受体的短肽配体。方法　利用可溶性TNF受体Ⅰ (sTNFRⅠ )蛋白筛选噬菌体随机六肽库 ,经过 4轮筛选和酶联免疫吸附测定 ,获得能和sTNFR相结合的噬菌体克隆。对部分阳性噬菌体克隆进行DNA测序 ,推算出相应的氨基酸序列 ,并进行保守性分析。按其中的保守序列进行多肽设计、合成 ,通过细胞学实验鉴定其生物活性。结果　得到 30个可模拟TNF的阳性克隆 ,对其中 6个进行单链DNA测序和分析。合成和纯化短肽 (八肽 )WH70 1,体外细胞毒实验结果证实了该序列的有效性。结论　获得了可模拟TNF受体亲和力的短肽配体 ,为研制新的TNF受体显像多肽配基提供了实验依据。