噬菌体展示技术筛选灵芝8蛋白配体短肽及其活性检测

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缩略词简表

第一章 绪 论

1.1前言

1.2灵芝免疫调节蛋白

1.2.1 真菌免疫调节蛋白

1.2.2 LZ-8的结构

1.2.3 LZ-8的功能

1.2.4 LZ-8的制备和检测

1.3 噬菌体展示技术的研究进展

1.3.1 噬菌体展示技术的原理

1.3.2 丝状噬菌体展示系统

1.3.3 噬菌体展示技术的应用

1.4 研究目的与研究内容

1.4.1 研究目的

1.4.2 研究内容

第二章 rLZ-8特异性配体短肽的筛选

2.1 实验材料

2.1.1 主要实验试剂

2.1.2 主要实验仪器

2.1.3 相关试剂盒，抗体及主要溶液配制

2.2 实验方法

2.2.1 宿主菌ER2738的活化与保存

2.2.2 噬菌体展示技术筛选rLZ-8蛋白特异性亲和配体

2.2.3 ELISA方法初步鉴定噬菌体克隆与rLZ-8蛋白结合情况

2.2.4重组噬菌体的ssDNA提取及测序

2.3 实验结果与讨论

2.3.1 噬菌体四轮筛选滴度测定图片

2.3.2 噬菌体四轮生物淘选结果

2.3.2 通过ELISA方法初步鉴定噬菌体克隆与rLZ-8蛋白结合情况

2.3.3 重组噬菌体的ssDNA提取

2.3.4 序列的统计与分析结果

2.4 小结

第三章 多肽的合成及其与rLZ-8结合活性的检测

3.1 实验材料

3.1.1 主要实验试剂

3.1.2 主要实验仪器

3.1.3 主要溶液配制

3.2 实验方法

3.2.1 多肽的合成

3.2.2通过生物膜干涉技术检测多肽与rLZ-8之间结合活性

3.3 实验结果与讨论

3.3.1 rLZ-8特异性亲和配体短肽的合成

3.3.2 rLZ-8特异性亲和配体短肽的纯化与质谱鉴定

3.3.3 通过生物膜干涉技术检测生物素标记多肽与rLZ-8之间结合活性

3.4 小结

第四章 rLZ-8检测方法学的建立及其在发酵液检测上的应用

4.1 实验材料

4.1.1 实验试剂

4.1.2 主要实验仪器设备

4.1.3 主要溶液配制

4.2 实验方法

4.2.1 rLZ-8检测方法学的建立

4.2.2 rLZ-8检测方法在发酵液检测上的应用

4.3 实验结果与讨论

4.3.1 rLZ-8检测标准曲线的建立

4.3.2 加标回收率实验

4.3.3 重复性实验

4.3.4 稳定性实验

4.3.5 rLZ-8发酵液的检测

4.4 小结

第五章 结论与展望

5.1 结论

5.2 展望

致谢

参考文献