乙酰肝素酶生物素-链亲和素系统时间分辨荧光免疫分析法的建立及应用

摘要

目的 建立测定乙酰肝素酶(HPA)的生物素-链亲和素系统(BSA) TRFIA并进行初步应用.方法 采用部分基因重组的鼠抗人HPA单克隆抗体包被微孔板条,加入HPA标准品和生物素标记的HPA,两者竞争性结合HPA单克隆抗体,再利用铕标记链亲和素(Eu3+-SA)作为示踪物,建立竞争法BSA-TRFIA.利用该方法检测健康人血清样本(n=32)和肿瘤患者血清样本(n=54)HPA水平,并比较TRFIA结果与ELISA结果的相关性.数据分析采用两样本t检验或t’检验、直线相关分析.结果 该法测定HPA的灵敏度为0.33 iug/L,批内和批间CV分别为5.29%和7.54%,平均回收率为105.5%,标准曲线范围为O-1 000 txg/L.健康人血清样本测定结果为(2.03±1.47)p.g/L,患者血清样本为(22.13_+7.38) tg/L(t’=19.388.P