荧光免疫测定

摘要： 目的 对多重微球流式荧光免疫法(MBFFI)检测抗线粒体抗体(AMA)M2亚型、抗核孔膜蛋白抗体(gp210抗体)与抗核体蛋白抗体(sp100抗体)结果进行分析,并评估其对原发性胆汁性胆管炎(PBC)的诊断价值.方法 选取2018年8月—2020年6月于青岛大学附属医院就诊并临床确诊的PBC患者340例(PBC组),其他疾病组143例,健康体检者117例.应用MBFFI与免疫印迹法(IBT)分别检测受试者血清中AMA-M2、gp210、sp1003种自身抗体,用Kappa检验比较两种方法对同一种自身抗体检测结果的一致性;应用受试者工作特征曲线评估MBFFI检测3种抗体对PBC的诊断价值;阳性率的比较采用χ2检验.结果 PBC组中两种方法检测一致性最好的抗体为AMA-M2(Kappa=0.874),gp210与sp100抗体的一致性较好(Kappa=0.713,Kappa=0.749).MBFFI检测AMA-M2抗体的敏感度(72.06％)最高;联合检测gp210与sp100两种抗体的敏感度(44.71％)高于单项抗体,联合检测AMA-M2、gp210与sp1003种抗体的敏感度(82.65％)高于单项抗体.3种抗体联合检测诊断PBC的受试者工作特征曲线下面积最大(0.9070).结论 MBFFI检测PBC自身抗体与IBT检测结果一致性较好.MBFFI联合检测AMA-M2、gp210和sp100抗体诊断PBC的敏感度更高,诊断价值更大.

摘要： 目的从组织学层面对过敏性鼻炎(AR)鼻黏膜上皮细胞紧密连接表达情况进行研究。方法在首都医科大学附属北京同仁医院鼻过敏科手术患者中,收集6名正常对照鼻黏膜和7例AR患者鼻黏膜,应用实时荧光定量PCR和免疫荧光共聚焦显微镜检测紧密连接蛋白和mRNA的表达情况。结果实时荧光定量PCR结果显示紧密连接蛋白claudin-1、claudin-4、claudin-7、occludin、ZO-1和ZO-2 mRNA在AR鼻黏膜中表达较正常对照组下调,尤其是claudin-7、occludin、ZO-1和ZO-2;免疫荧光共聚焦显微镜检测发现claudin-1、claudin-4、claudin-7、occludin和ZO-1表达减弱。结论AR鼻黏膜上皮细胞多种紧密连接蛋白表达下降,成为黏膜屏障功能下降、过敏原得以进入体内引发变态反应的原因。

摘要： 目的 探讨miR?558通过对叉头框转录因子C1(Forkhead box protein C1,FOXC1)的调控从而对人卵巢癌腺癌细胞(SKOV3)增殖和侵袭能力的影响.方法 选择2014年1月至2017年12月郑州大学第三附属医院妇产科收治的上皮性卵巢癌病人25例、交界性卵巢上皮性肿瘤病人25例和良性卵巢上皮性肿瘤病人25例,三组病例均行手术治疗,取其部分经手术切除的卵巢组织标本,使用实时荧光定量PCR技术来分析微小RNA?558(miR?558)的表达水平.把卵巢癌SKOV3细胞分成三组,分别为miR?558模拟物组、抑制物组和阴性对照组.通过靶基因预测网站来预测miR?558的靶基因(FOXC1基因),通过荧光素酶报告基因实验来验证miR?558对FOXC1基因表达的调控作用.通过实时荧光定量?PCR技术和蛋白印迹法来分析转染后各组细胞的miR?558和FOXC1的表达水平.通过细胞增殖实验(Cell Counting Kit?8,CCK?8法)检测三组细胞的增殖率.通过基质胶侵袭实验检测三组细胞的侵袭能力.结果 实时荧光定量?PCR结果显示,在上皮性卵巢癌、交界性卵巢上皮性肿瘤和良性卵巢上皮性肿瘤病人的卵巢组织中,miR?558的相对表达水平分别为(3.43±0.42)、(2.47±0.35)、(1.37±0.31);在miR?558模拟物组、抑制物组和阴性对照组中,SKOV3细胞miR?558的表达水平分别为(2.37±0.17)、(0.64±0.17)、(1.14±0.11).在miR?558模拟物组、抑制物组和阴性对照组中,SKOV3细胞的FOXC1基因转录出的信使RNA(mRNA)表达水平分别为(0.51±0.10)、(2.27±0.12)、(0.99±0.11).荧光素酶报告基因实验结果显示,SKOV3细胞被含miR?558的质粒以及含FOXC1基因的重组质粒共同转染后,的荧光素酶活性下降了49.50％(P<0.05).蛋白印迹结果显示,上述三组SKOV3细胞中,FOXC1蛋白的表达水平分别为(0.83±0.07)、(2.17±0.15)、(1.47±0.21).CCK?8检测结果显示,不同时间miR?558模拟物组SKOV3细胞的增殖率明显高于阴性对照组(P<0.05),不同时间miR?558抑制物组SKOV3细胞的增殖率明显低于阴性对照组(P<0.05).基质胶侵袭实验结果显示,上述三组SKOV3细胞穿透基底膜的细胞数分别为(158.33±9.45)、(67.01±10.58)、(117.67±16.86)(P<0.05).结论 miR?558能够通过靶向调控FOXC1的表达,促进SKOV3细胞的增殖能力和侵袭能力,从而参与卵巢癌的发生发展.

摘要： 目的 探讨异型淋巴细胞、EB病毒-DNA(EBV-DNA)和EBV抗CA-IgM(VCA-IgM)阳性率对传染性单核细胞增多症(IM)的诊断价值.方法 收集2018年9月至2019年4月在宜宾市第一人民医院就诊的128例IM病儿和80例健康对照者.测试异型淋巴细胞、VCA-IgM和EBV-DNA的阳性率,并比较这3个指标在IM诊断中的价值.结果 EB感染组异型淋巴细胞、VCA-IgM和EBV-DNA阳性率(61.72％、70.31％、95.31％)明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05);三者诊断IM的特异度和阳性预测值差异无统计学意义(P>0.05).三者联合检测诊断IM的灵敏度为96.88％,特异度为96.25％.结论 EBV-DNA阳性率对IM的诊断效能高于其他两项检测指标,但异型淋巴细胞(大于10％)诊断IM的特异度达到100％.若三者联合检测,其对于IM的早期诊断价值将进一步提升.

摘要： 目的:探讨抗核抗体(ANA)、抗心磷脂抗体(aCL)和抗β2糖蛋白1抗体(aβ2GP1)是否可作为非高龄卵巢功能减退(DOR)患者行体外受精/胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)前病因筛查的检测指标.方法:收集2018年1月—2019年4月在南京医科大学第一附属医院生殖医学科接受IVF/ICSI助孕的非高龄DOR患者(非高龄DOR组,127例)和因男方因素行IVF/ICSI助孕的女性患者(对照组,82例)为研究对象,收集血清,采用免疫荧光法检测ANA,酶联免疫吸附法检测aCL和aβ2GP1.结果:非高龄DOR组3项抗体中至少1项阳性的总阳性率(24.41％,31/127)高于对照组(12.20％,10/82),差异有统计学意义(P0.05);非高龄DOR组aCL总阳性率(8.66％,11/127)与对照组(6.10％,5/82)比较,差异无统计学意义(P>0.05);非高龄DOR组aβ2GP1阳性率(15.75％,20/127)高于对照组(6.10％,5/82),差异有统计学意义(P<0.05).结论:非高龄DOR患者aβ2GP1阳性率较高,对非高龄DOR患者推荐在IVF/ICSI助孕前进行血清ANA、aCL和aβ2GP1联合筛查.

摘要： 目的：检测和分析非肌性肌球蛋白重链II A(NMMHC-ⅡA)在MYH9-RD患者中性粒细胞胞浆中的定位及表达，以确定包涵体的构成本质。方法：应用间接免疫荧光技术,观察MYH9-RD患者及正常对照者NMMHC—ⅡA在胞浆中的定位和分布情况;应用Westemblot技术检测和分析中性粒细胞中NMMHC—Ⅱ A在患者和正常对照者之间蛋白表达水平的差异。结果：免疫荧光技术清楚地显示了患者中性粒细胞胞浆中呈绿色荧光的“梭形”包涵体的形态和轮廓,与瑞特姬姆萨染色染色显示的包涵体形状、大小基本一致.但更为清晰;而正常对照者除有散点状的荧光斑点外，无包涵体形成;Westemblot结果显示患者NMMHC-ⅡA表达量较正常对照者降低。结论：MYH9-RD患者中性粒细胞包涵体的主要成份是NMMHC-Ⅱ A，NMMHC-Ⅱ A的显阴性作用导致了包涵体的形成。

摘要： 目的：检测和分析非肌性肌球蛋白重链II A(NMMHC-ⅡA)在MYH9-RD患者中性粒细胞胞浆中的定位及表达，以确定包涵体的构成本质。方法：应用间接免疫荧光技术,观察MYH9-RD患者及正常对照者NMMHC—ⅡA在胞浆中的定位和分布情况;应用Westemblot技术检测和分析中性粒细胞中NMMHC—Ⅱ A在患者和正常对照者之间蛋白表达水平的差异。结果：免疫荧光技术清楚地显示了患者中性粒细胞胞浆中呈绿色荧光的“梭形”包涵体的形态和轮廓,与瑞特姬姆萨染色染色显示的包涵体形状、大小基本一致.但更为清晰;而正常对照者除有散点状的荧光斑点外，无包涵体形成;Westemblot结果显示患者NMMHC-ⅡA表达量较正常对照者降低。结论：MYH9-RD患者中性粒细胞包涵体的主要成份是NMMHC-Ⅱ A，NMMHC-Ⅱ A的显阴性作用导致了包涵体的形成。

摘要： 目的：检测和分析非肌性肌球蛋白重链II A(NMMHC-ⅡA)在MYH9-RD患者中性粒细胞胞浆中的定位及表达，以确定包涵体的构成本质。方法：应用间接免疫荧光技术,观察MYH9-RD患者及正常对照者NMMHC—ⅡA在胞浆中的定位和分布情况;应用Westemblot技术检测和分析中性粒细胞中NMMHC—Ⅱ A在患者和正常对照者之间蛋白表达水平的差异。结果：免疫荧光技术清楚地显示了患者中性粒细胞胞浆中呈绿色荧光的“梭形”包涵体的形态和轮廓,与瑞特姬姆萨染色染色显示的包涵体形状、大小基本一致.但更为清晰;而正常对照者除有散点状的荧光斑点外，无包涵体形成;Westemblot结果显示患者NMMHC-ⅡA表达量较正常对照者降低。结论：MYH9-RD患者中性粒细胞包涵体的主要成份是NMMHC-Ⅱ A，NMMHC-Ⅱ A的显阴性作用导致了包涵体的形成。

摘要： 目的：检测和分析非肌性肌球蛋白重链II A(NMMHC-ⅡA)在MYH9-RD患者中性粒细胞胞浆中的定位及表达，以确定包涵体的构成本质。方法：应用间接免疫荧光技术,观察MYH9-RD患者及正常对照者NMMHC—ⅡA在胞浆中的定位和分布情况;应用Westemblot技术检测和分析中性粒细胞中NMMHC—Ⅱ A在患者和正常对照者之间蛋白表达水平的差异。结果：免疫荧光技术清楚地显示了患者中性粒细胞胞浆中呈绿色荧光的“梭形”包涵体的形态和轮廓,与瑞特姬姆萨染色染色显示的包涵体形状、大小基本一致.但更为清晰;而正常对照者除有散点状的荧光斑点外，无包涵体形成;Westemblot结果显示患者NMMHC-ⅡA表达量较正常对照者降低。结论：MYH9-RD患者中性粒细胞包涵体的主要成份是NMMHC-Ⅱ A，NMMHC-Ⅱ A的显阴性作用导致了包涵体的形成。

摘要： 目的:在我国河南省农村地区调查妇女高危型人乳头状瘤病毒(HPV)的感染情况,并探讨与人乳头状瘤病毒感染有关的危险因素。rn 方法:对河南省新密市的农村妇女(881名)开展以人群为基础的子宫颈癌横断面调查,分析其中20～54岁有性生活史的女性.使用自我取样和医生取样2种方法收集妇女阴道分泌物,使用杂交捕获二代试验(HC2)检测标本13种高危型HPV感染情况.对结果异常的妇女进行阴道镜及活组织病理检查,最终以病理诊断结果作为金标准.rn 结果:共调查妇女881名,收集HPV自我取样标本881份和医生取样标本880份.自我取样和医生取样HPVs感染率分别是13.05％和12.27％.各个年龄组(20岁～、25岁～、30岁～、35岁～、40岁～、45岁～、50～54岁)HPVs感染率分别是10.57％、9.60％、12.00％、9.52％、17.60％、13.74％、12.80％.随着宫颈病变程度增加HPV感染率呈上升趋势;随着教育水平的提高HPV感染率逐渐增加;丈夫性伴侣数＞1的妇女HPV感染率是18.02％,丈夫性伴侣数为1的妇女HPV感染率是10.88％,差异有统计学意义.rn 结论:该地区的高危型HPV感染率较高,HPV感染与年龄无关,性行为是其主要危险因素。

摘要： 目的:在我国河南省农村地区调查妇女高危型人乳头状瘤病毒(HPV)的感染情况,并探讨与人乳头状瘤病毒感染有关的危险因素。rn 方法:对河南省新密市的农村妇女(881名)开展以人群为基础的子宫颈癌横断面调查,分析其中20～54岁有性生活史的女性.使用自我取样和医生取样2种方法收集妇女阴道分泌物,使用杂交捕获二代试验(HC2)检测标本13种高危型HPV感染情况.对结果异常的妇女进行阴道镜及活组织病理检查,最终以病理诊断结果作为金标准.rn 结果:共调查妇女881名,收集HPV自我取样标本881份和医生取样标本880份.自我取样和医生取样HPVs感染率分别是13.05％和12.27％.各个年龄组(20岁～、25岁～、30岁～、35岁～、40岁～、45岁～、50～54岁)HPVs感染率分别是10.57％、9.60％、12.00％、9.52％、17.60％、13.74％、12.80％.随着宫颈病变程度增加HPV感染率呈上升趋势;随着教育水平的提高HPV感染率逐渐增加;丈夫性伴侣数＞1的妇女HPV感染率是18.02％,丈夫性伴侣数为1的妇女HPV感染率是10.88％,差异有统计学意义.rn 结论:该地区的高危型HPV感染率较高,HPV感染与年龄无关,性行为是其主要危险因素。

摘要： 目的:在我国河南省农村地区调查妇女高危型人乳头状瘤病毒(HPV)的感染情况,并探讨与人乳头状瘤病毒感染有关的危险因素。rn 方法:对河南省新密市的农村妇女(881名)开展以人群为基础的子宫颈癌横断面调查,分析其中20～54岁有性生活史的女性.使用自我取样和医生取样2种方法收集妇女阴道分泌物,使用杂交捕获二代试验(HC2)检测标本13种高危型HPV感染情况.对结果异常的妇女进行阴道镜及活组织病理检查,最终以病理诊断结果作为金标准.rn 结果:共调查妇女881名,收集HPV自我取样标本881份和医生取样标本880份.自我取样和医生取样HPVs感染率分别是13.05％和12.27％.各个年龄组(20岁～、25岁～、30岁～、35岁～、40岁～、45岁～、50～54岁)HPVs感染率分别是10.57％、9.60％、12.00％、9.52％、17.60％、13.74％、12.80％.随着宫颈病变程度增加HPV感染率呈上升趋势;随着教育水平的提高HPV感染率逐渐增加;丈夫性伴侣数＞1的妇女HPV感染率是18.02％,丈夫性伴侣数为1的妇女HPV感染率是10.88％,差异有统计学意义.rn 结论:该地区的高危型HPV感染率较高,HPV感染与年龄无关,性行为是其主要危险因素。

摘要： 目的:在我国河南省农村地区调查妇女高危型人乳头状瘤病毒(HPV)的感染情况,并探讨与人乳头状瘤病毒感染有关的危险因素。rn 方法:对河南省新密市的农村妇女(881名)开展以人群为基础的子宫颈癌横断面调查,分析其中20～54岁有性生活史的女性.使用自我取样和医生取样2种方法收集妇女阴道分泌物,使用杂交捕获二代试验(HC2)检测标本13种高危型HPV感染情况.对结果异常的妇女进行阴道镜及活组织病理检查,最终以病理诊断结果作为金标准.rn 结果:共调查妇女881名,收集HPV自我取样标本881份和医生取样标本880份.自我取样和医生取样HPVs感染率分别是13.05％和12.27％.各个年龄组(20岁～、25岁～、30岁～、35岁～、40岁～、45岁～、50～54岁)HPVs感染率分别是10.57％、9.60％、12.00％、9.52％、17.60％、13.74％、12.80％.随着宫颈病变程度增加HPV感染率呈上升趋势;随着教育水平的提高HPV感染率逐渐增加;丈夫性伴侣数＞1的妇女HPV感染率是18.02％,丈夫性伴侣数为1的妇女HPV感染率是10.88％,差异有统计学意义.rn 结论:该地区的高危型HPV感染率较高,HPV感染与年龄无关,性行为是其主要危险因素。

摘要： 目的 探讨肺炎衣原体(Cpn)急性感染在呼吸道疾病中的重要性.方法 用微量免疫荧光(MIF)试验检测了93例住院病人血清中Cpn抗体IgG,同时用PCR测定了其中55例病人咽试子标本中Cpn DNA.结果 35.5﹪呼吸道疾病存在Cpn急性感染.在肺炎组抗体(效价≥512)阳性率为47.6﹪,提示98年至99年可能处在北京市Cpn流行期.在哮喘组的阳性率达到50﹪;在肺心病组和肺癌组的阳性率分别为50.0﹪和26.3﹪.PCR检测Cpn的阳性率仅为9.1﹪,MIF和PCR的检测结果存在差别.结论 检测Cpn抗体IgG有助于对Cpn急性感染进行诊断,从而指导临床用药.

摘要： 目的 探讨肺炎衣原体(Cpn)急性感染在呼吸道疾病中的重要性.方法 用微量免疫荧光(MIF)试验检测了93例住院病人血清中Cpn抗体IgG,同时用PCR测定了其中55例病人咽试子标本中Cpn DNA.结果 35.5﹪呼吸道疾病存在Cpn急性感染.在肺炎组抗体(效价≥512)阳性率为47.6﹪,提示98年至99年可能处在北京市Cpn流行期.在哮喘组的阳性率达到50﹪;在肺心病组和肺癌组的阳性率分别为50.0﹪和26.3﹪.PCR检测Cpn的阳性率仅为9.1﹪,MIF和PCR的检测结果存在差别.结论 检测Cpn抗体IgG有助于对Cpn急性感染进行诊断,从而指导临床用药.

摘要： 本发明公开了可抑制被检样品中的干扰物质的影响并使免疫测定法的准确性提高的免疫测定法用测定值降低抑制剂、以及使用其的抑制干扰物质引起的测定值降低的免疫测定法和免疫测定法用试剂。用于抑制干扰物质引起的测定值降低的免疫测定法用测定值降低抑制剂含有离子型表面活性剂，所述离子型表面活性剂为具有离子性官能团的疏水性环状单体聚合而成的聚合物，分子量为1000-10万。

摘要： 本发明的课题在于提供一种免疫测定法，其不需要固相步骤和洗涤步骤，能够在液相中快速且简便地进行目标物质的定量测定，并且能够使抗原可视化，检测灵敏度高。通过如下方式解决所述的课题，依次进行下述(a)～(c)的步骤来测定受试物质中存在的目标抗原的浓度：(a)在液相中，使包括含有抗体轻链可变区域的多肽和含有抗体重链可变区域的多肽的复合体与用于测定的试样中的抗原接触的步骤，所述含有抗体轻链可变区域的多肽和含有抗体重链可变区域的多肽中的任一个或两者由荧光染料标记；(b)检测所述荧光染料的荧光、或测定荧光强度的步骤；(c)以抗原浓度与所述荧光染料的荧光强度存在正相关关系为指标，算出样本中所含的抗原量，或使抗原可视化的步骤。

摘要： 本发明涉及利用免疫荧光的酶免疫测定的组合物。本发明的特征在于所述组合物包含(i)荧光生成酶促底物以及(ii)在荧光生成酶促底物(i)的水解之后形成荧光化合物的猝灭的荧光生成化合物。

摘要： 本发明涉及用于免疫测定的具有一定直径和驻留面积的致敏的羧化物修饰的乳液微粒以及灵敏且特异的不需要样品预处理的免疫测定试剂。

摘要： 本发明公开了可抑制被检样品中的干扰物质的影响并使免疫测定法的准确性提高的免疫测定法用测定值降低抑制剂、以及使用其的抑制干扰物质引起的测定值降低的免疫测定法和免疫测定法用试剂。用于抑制干扰物质引起的测定值降低的免疫测定法用测定值降低抑制剂含有离子型表面活性剂，所述离子型表面活性剂为具有离子性官能团的疏水性环状单体聚合而成的聚合物，分子量为1000－10万。

摘要： 本发明的课题在于提供一种免疫测定法，其不需要固相步骤和洗涤步骤，能够在液相中快速且简便地进行目标物质的定量测定，并且能够使抗原可视化，检测灵敏度高。通过如下方式解决所述的课题，依次进行下述(a)～(c)的步骤来测定受试物质中存在的目标抗原的浓度：(a)在液相中，使包括含有抗体轻链可变区域的多肽和含有抗体重链可变区域的多肽的复合体与用于测定的试样中的抗原接触的步骤，所述含有抗体轻链可变区域的多肽和含有抗体重链可变区域的多肽中的任一个或两者由荧光染料标记；(b)检测所述荧光染料的荧光、或测定荧光强度的步骤；(c)以抗原浓度与所述荧光染料的荧光强度存在正相关关系为指标，算出样本中所含的抗原量，或使抗原可视化的步骤。

摘要： 本发明涉及利用免疫荧光的酶免疫测定的组合物。本发明的特征在于所述组合物包含(i)荧光生成酶促底物以及(ii)在荧光生成酶促底物(i)的水解之后形成荧光化合物的猝灭的荧光生成化合物。

摘要： 本发明提供一种高灵敏度的抗RS病毒抗体、及使用其的检查试剂。一种抗RS病毒N蛋白单克隆抗体或其的抗原结合性片段，与基于RS病毒的N蛋白的氨基酸序列制作的127个肽点中至少包含序列号30、39、40、69、70、74、75、83、84、100、101及113所表示的氨基酸序列的肽进行反应。

摘要： 本发明提供一种高灵敏度抗体、及使用其的检查试剂。一种免疫测定方法，通过使用固定化有抗原、抗体或其抗原结合性片段的载体的免疫测定方法对测定对象进行检测，向包含抗原、抗体或其抗原结合性片段的溶液中添加二糖类及糖醇类，将抗原、抗体或其抗原结合性片段固定化于载体，通过使用该载体提高检测灵敏度而对测定对象进行检测。

摘要： 本申请提供一种灵敏度高的抗RS病毒抗体、以及使用了该抗体的检查试剂。一种抗RS病毒N蛋白单克隆抗体或其抗原结合性片段，包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含序列号1所表示的氨基酸序列，所述轻链可变区包含序列号2、3或4所表示的氨基酸序列。