链霉亲和素-生物素化学发光免疫分析血清胰岛素方法建立及临床应用

摘要

目的:建立链霉亲和素-生物素双抗体夹心一步法测量人胰岛素化学发光免疫分析方法,并进行临床应用检测.方法:以链霉亲和素包被微孔板,生物素化一株单克隆抗体,辣根过氧化物酶标记另一株单克隆抗体.校准品与胰岛素国家标准品进行溯源,建立免疫分析方法,进行性能参数测试.收集40例正常人、12例1型、29例2型糖尿病人血清,统计整理参考值,并与国外同类试剂盒进行对比.结果:该方法回收率94.13%,线性范围(2～200)μIU/ml,灵敏度0.05μIU/ml,批内、批间变异系数(CV)分别为2.87%～7.06%和3.24%～9.14%,与牛胰岛素、猪胰岛素、人前胰岛素原、胰岛素样生长因子Ⅰ交叉反应率分别为27.2%、19.7%、0.16%、0.07%,与C肽、胰高血糖素、生长抑素无交叉反应.本法与国外同类试剂盒同时检测40份正常人葡萄糖耐量试验血清,r为0.9869,本法37℃ 7d热稳定性良好,建立一组正常人葡萄糖耐量参考值.结论:本法各项指标均满足临床检测要求,达到国外同类产品水平,反应快速,操作简单,便于临床检验应用.