肺炎链球菌血清型7F荚膜多糖结合物中游离多糖含量的测定

摘要

目的:建立一种肺炎链球菌血清型7F荚膜多糖结合物(Pn7F-CRM197)中游离多糖含量的检测方法.方法:在不同的酸性pH下分别对Pn7F纯化多糖和多糖蛋白结合液进行脱氧胆酸钠酸沉处理,筛选出可以完全沉淀结合物但不沉淀多糖的pH范围;对含有不同蛋白浓度的结合液进行脱氧胆酸钠酸沉处理,筛选出结合物酸沉的最适蛋白浓度范围;验证该方法的准确度和重复性并考察蒽酮法分析多糖浓度的专属性.结果:当pH在2.5 ～4.0之间且蛋白浓度为100 ～ 300 mg·L-1时,脱氧胆酸钠对结合物的沉淀效果最好,对纯化多糖无沉淀作用.结论:脱氧胆酸钠在所选定的pH条件下能专一沉淀结合物,而对游离多糖无沉淀作用,该方法的准确度和重复性均可达到检测要求,多糖浓度的分析方法专属性好,可用于Pn7F-CRM197结合物中游离多糖含量的检测.