一种简化改良的脑胶质瘤干细胞培养方法

摘要

背景与目的:目前对胶质瘤干细胞(brain glioma stem cells,BGSCs)的研究仍以细胞实验研究为主,因此培养出大量合格的BGSCs是所有相关研究的首要步骤.本实验用一种新的较简化的方法从临床人脑胶质瘤标本中进行脑胶质瘤干细胞的培养纯化.方法:对17例脑胶质瘤患者的手术标本进行处理,无血清悬浮培养法进行干细胞培养.肿瘤细胞球形成后,进行增殖实验、单克隆形成实验以及诱导分化实验,并用免疫细胞化学方法检测相关的标志物.连续传代+条件培养方式进行分离纯化.结果:17例标本中共有8例成功培养出肿瘤细胞球,连续传代后仍然具有良好的增殖能力,单克隆形成实验证实单个肿瘤球细胞即可形成新的肿瘤细胞球.免疫细胞化学检测显示肿瘤球细胞表达胶质瘤干细胞的标志物CD133,诱导分化后的肿瘤球细胞可以表达成熟神经细胞的标志物GFAP和TU-20.以上结果证明培养出的肿瘤球细胞即为脑胶质瘤干细胞.结论:用无血清干细胞培养基对脑胶质瘤组织进行处理培养,用条件培养+连续传代的方法即可快捷高效地获得大量高纯度脑胶质瘤干细胞.此方法大大节约了费用和时间,可以满足后续脑胶质瘤干细胞实验研究的要求.