一种基于环介导等温扩增技术原理的组织胞浆菌分子诊断技术

摘要

目的 研发一种基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术原理的组织胞浆菌感染的分子诊断技术.方法 以组织胞浆菌为研究对象,针对其种特异性的M抗原基因序列,设计并筛选数套基于LAMP技术的特异性引物,同时优化其反应条件,建立一种针对组织胞浆菌感染的快速分子鉴定技术.结果 该LAMP技术在65℃、90 Min反应条件下,对组织胞浆菌基因组DNA的检测敏感度达到5.3 pg/反应(即5.3×10(12)g,约160个基因组DNA拷贝),且与其相近种属真菌无交叉反应.结论 我们研发的这种基于LAMP技术原理的组织胞浆菌分子诊断技术具有操作简便、特异性及敏感性高等优点,具有临床推广应用的潜力.