弱酸洗脱提取的肿瘤抗原肽致敏的树突状细胞对CTL的体内外激活效应

摘要

目的 弱酸洗脱提取小鼠红白血病细胞膜表面肿瘤抗原肽,用于致敏树突状细胞(dendritic cells,DC),观察其对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的体内外激活效应.方法 以pH3.3的枸橼酸-磷酸盐缓冲液室温下处理FBL-3小鼠红白血病细胞5 min,流式细胞术检测洗脱效率;弱酸洗脱的抗原肽经SepPak C18柱提取纯化,用于致敏DC,检测其体外刺激CTL细胞株增殖的能力及体内激发特异性抗肿瘤免疫应答的能力.结果 弱酸可以洗脱肿瘤细胞膜表面绝大部分与MHCⅠ类分子结合的抗原肽;经此抗原肽致敏的DC,体外可以激发特异性识别FBL-3细胞抗原九肽CCLCLTVFL的CD8+CTL细胞株增殖,回输小鼠,可以诱导体内生成高水平的特异性CTL活性,使小鼠获得抵抗后继FBL-3细胞攻击的免疫保护能力,并显著高于肿瘤冻融抗原致敏的DC回输组.结论 弱酸可以有效洗脱肿瘤细胞表面的Ⅰ类抗原肽,该类多肽致敏的DC,在体内外均可激活CTL,有效地诱导特异性抗肿瘤免疫功能.