噬菌体表达短肽模拟日本血吸虫肝门型童虫表膜抗原表位的研究

摘要

目的从噬菌体随机12肽库免疫筛选日本血吸虫肝门型童虫表膜抗原(SjHmAg)的模拟短肽分子,探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果. 方法以纯化的SjHmAg 免疫血清IgG为配基免疫筛选噬菌体12肽库,按吸附-洗脱-扩增的淘洗过程进行3轮筛选;随机挑取噬菌体克隆用ELISA检测其特异性,并测序;用混和噬菌体克隆皮下免疫小鼠3次,分别在0、2、4周进行,第6周每鼠经腹部感染40±1条日本血吸虫尾蚴,42d后剖杀冲虫,观察减虫及减卵效果. 结果经3轮筛选,特异性噬菌体得到有效的富集,产出率为第一轮的210倍;随机挑取24个噬菌体克隆经ELISA鉴定,有21个克隆能与SjHmAg免疫血清特异性反应;自动测序仪测序,结果发现它们的外源肽具核心序列(STRKD);与对照组相比,混和噬菌体克隆免疫小鼠的减虫率为16.2%,减卵率为59.0%. 结论利用噬菌体展示技术可获得模拟SjHmAg短肽,这些短肽分子能诱导部分抗日本血吸虫保护力.