地塞米松对小鼠哮喘模型脾巨噬细胞TLR2和TLR4 mRNA表达的影响

摘要

目的检测变应性哮喘模型鼠及地塞米松(dexamethasone,DM)处理的模型鼠脾脏巨噬细胞TLR2和TLR4 mRNA的表达.方法采用贴壁法分离BALB/c小鼠脾巨噬细胞,以SYBR-greenⅠ作荧光指示剂,次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶基因(hypoxanthine-phosphoribosyl-transferase gene,HPRT)作管家基因,应用LightCycler实时PCR技术,检测TLR2和TLR4mRNA与管家基因HPRT cDNA的荧光域值循环数(the number of PCRthreshold value cycles,Ct),分别记为Ct2、Ct4和CtH,计算Ct2、Ct4与CtH的比值(Ct2/CtH、Ct4/CtH)为标本的TLR2和TLR4在mRNA水平上的相对表达量.结果对照组与哮喘组小鼠Ct2/CtH差异有统计学意义(P＜0.05),哮喘组TLR2 mRNA表达下调;哮喘组与哮喘DM组小鼠Ct2/CtH差异有统计学意义(P＜0.05),哮喘DM组TLR2 mRNA表达上调;对照组与哮喘组小鼠Ct4/CtH差异无统计学意义(P＞0.05);哮喘组与哮喘DM组小鼠Ct4/CtH差异有统计学意义(P＜0.05),哮喘DM组相对哮喘组TLR4 mRNA表达上调.结论变应性哮喘模型鼠脾脏巨噬细胞TLR4mRNA的表达并没有变化,没有减弱对病原相关分子模式的识别;而变应性哮喘模型鼠脾脏巨噬细胞TLR2 mRNA的表达下调;DM可以上调哮喘组TLR2和TLR4 mRNA的表达;其中的机理有待进一步的深入研究.