甲型流感病毒NS1抗原捕获ELISA的建立

摘要

目的建立基于单克隆抗体的甲型流感病毒非结构蛋白1（NS1）抗原检测的酶联免疫吸附（ELISA）法。方法用甲型流感病毒NS1特异性单克隆抗体,通过抗体的优化组合,建立双抗体夹心抗原捕获ELISA,检测不同来源的流感病毒及副流感病毒。结果对多种抗体组合进行反复筛选,最终确定了特异性检测到甲型流感病毒的NS1蛋白,而与乙型流感病毒和副流感病毒不发生交叉反应的最佳抗体组合。该方法检测重组H5N1-NS1[A/HongKong/486/97（H5N1）-NS1和A/Vietnam/1194/04（H5N1）-NS1]蛋白的灵敏度最低检测值分别为15.6 ng/ml和240 pg/ml。结论成功建立了甲型流感病毒NS1抗原捕获ELISA,为建立甲型流感病毒感染早期诊断新方法奠定基础。