甜菜碱促进高GC含量p16基因的PCR扩增

摘要

@@ GC含量高的DNA序列在基因组中广泛存在,它们特别容易形成二级结构干扰PCR扩增,难以得到所需目的基因.为解决此问题,采取了各种措施如增加变性及退火温度;用NaOH进行DNA模板变性;加入DMSO、甘油、甲酰胺等溶剂破坏碱基配对;加入dGTP类似物以降低熔解温度Tm等.但上述办法只对部分GC丰富DNA的扩增有效,许多情况下完全无效.近年研究发现甜菜碱能克服这个困难[1-3],我们参考国外报道在PCR中加入甜菜碱,结果成功地扩增出用标准PCR扩增失败的高GC含量的p16全长cDNA序列.