半巢式甲基化特异性聚合酶链反应在胃癌p16基因甲基化检测中的应用

摘要

目的改进甲基化特异性聚合酶链反应(MSP),采用半巢式MSP检测胃癌组织p16基因启动子区CpG岛的甲基化状态.方法用亚硫酸氢盐修饰被测DNA后,采用半巢式MSP(引物分别为MS,M1A和MS,M2A),分析了60例胃癌组织及相应正常组织中p16基因的甲基化状态.结果单独用MSP,胃癌组织中p16基因甲基化的发生率为80%.采用半巢式MSP,甲基化发生率为86.7%,比单独采用MSP提高了几个百分点,并提示胃癌病例的p16基因启动子区存在甲基化发生的不同模式.结论半巢式MSP能够有效地提高灵敏度和减少假阳性.同时,免疫组化的结果也说明了p16基因异常甲基化与胃癌组织P16蛋白的表达密切相关.