利用戊型肝炎病毒开放读码框架2截短多肽降低抗戊型肝炎病毒IgM检测中的假阳性

摘要

目的研究用戊型肝炎病毒4型（HEV-4）开放读码框架（ORF）2主要免疫表位截短多肽排除抗-HEV IgM检测中发生假阳性的可行性。方法用重组HEV4 ORF2蛋白主要抗原决定簇多肽（459-607位氨基酸）及其截短多肽（472～607位氨基酸）为抗原分别包被ELfSA板,用间接ELISA法分别检测35份HEV RNA阳性患者血清、69份健康人血清和117份可疑阳性血清标本的抗-HEV IgM,并用免疫印迹法（Western blot,WB）确认,逆转录（RT）-PCR检测HEV RNA加以比较。结果 WB检测结果显示,戊型病毒性肝炎患者血清中抗-HEV IgM仅与459～607多肽二聚体反应,而不与其单体及472～607多肽反应。间接ELISA法检测35份HEV RNA阳性患者血清抗-HEV IgM均能与459～607多肽反应,而不与472～607多肽反应;69名健康人血清与2种多肽都不反应。117份可疑阳性血清中,5份能同时与2种多肽反应,但450 nm吸光度（A450）值之差小于0.5。WB检测这5份血清抗-HEV IgM均阴性;RT-PCR检测HEV RNA为阴性,说明这5份血清为非特异性吸附引起的假阳性。结论 ORF2 459～607多肽可有效检测抗-HEV IgM,根据血清与2种多肽反应的A450差异,能有效排除因非特异性吸附导致的抗-HEV IgM假阳性。