儿茶酚O-甲基转移酶基因多态性分析方法探讨

摘要

目的建立限制性片段长度多态性(RFLP)和变性高效液相色谱(DHPLC)分析儿茶酚O-甲基转移酶(COMT)基因多态性的方法,探讨分析基因多态性与临床疾病发生风险关系的方法学.方法从子宫内膜癌患者和对照组的全血和蜡块包埋组织提取DNA,应用RFLP和DHPLC法检测COMT基因第4号外显子第158位密码子G/A的多态性,并结合DNA测序法分析两种方法的一致性.结果全血和蜡块组织提取的DNA均可扩增PCR产物,且可行酶切反应；所有全血和小部分蜡块DNA PCR产物可行DHPLC分析.测序法与RFLP法比较,Kappa值=0.697；与DHPLC测序法比较,Kappa值=0.924.结论 RFLP与测序法的一致性好,适用于全血和蜡块提取的DNA的基因多态性分析；DHPLC与测序法的一致性极好,但对机器和样本要求较高,适用于血DNA的基因多态性分析.