应用酵母单杂交技术筛选乙型肝炎病毒表面抗原基因启动子Ⅰ的结合蛋白

摘要

目的:寻找与乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原基因启动子I(SPI)相互作用的特异性结合蛋白,进一步探讨肝细胞中的蛋白对于HBV复制和表达的调节作用,阐明其分子作用机制.方法:应用酵母单杂交体系,以3重复串连的SPI核心序列为“诱饵”,对酵母细胞中的人肝细胞cDNA文库进行筛选,应用DNA序列测定及生物信息学方法对筛选出的结果进行分析.结果:共获得了12个双阳性克隆,编码10种不同的蛋白.其中有3个未知功能蛋白,其余为血清类粘蛋白2、丝氨酸脱水酶、人肝细胞生长因子样蛋白等蛋白.结论:这些蛋白在酵母细胞内SPI核心序列结合,可能是作用于SPI的反式作用因子,但它们对HBV-SPI是否有转录调控作用,笔者正进行进一步的研究.