应用荧光定量PCR技术检测HBV DNA低拷贝样品及临床意义分析

摘要

目的:观察荧光定量PCR技术对HBV DNA低拷贝样品检测的情况并探讨其临床意义.方法:采用荧光定量PCR和改良PCR法对一系列不同拷贝数的临床标本平行进行检测.结果:在电泳分析时PCR产物的亮度与样品的拷贝数呈正相关,＞103copies/ml的样品能经PCR扩增得到明亮的特异产物条带,103copies/ml的样品也可得到特异的弱条带,但102copies/ml的样品无法检测到特异产物,并有明亮的引物聚合体产生.结论:荧光定量PCR技术的检测准确下限为104copies/ml,103copies/ml的样品检测时存在很大的随机性,这种条件下的样品并不能用荧光定量PCR的方法进行准确检测,应该采用其他更灵敏的方法.