溶血磷脂酸对创伤失血性休克大鼠肝细胞凋亡的影响

摘要

目的 观察溶血磷脂酸(LPA)对创伤失血性休克(THS)模型大鼠肝细胞凋亡的影响.方法 选择69只健康雄性SD大鼠,按随机数字表法分为正常对照组(n=9)、THS模型组(n=30)、LPA预处理组(n=30).?采用将大鼠双侧股骨中段折断,右侧股动脉插管放血,将血压维持在35～40?mmHg(1?mmHg≈0.133?kPa)的方法复制大鼠THS模型.LPA预处理组制模前20?min和制模后10?min静脉注射LPA(1?mg/kg);正常对照组和THS模型组给予等量生理盐水.于制模后1、6、12?h处死大鼠取血,检测各组大鼠丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)水平;采用原位末端缺刻标记试验(TUNEL)检测肝脏组织细胞凋亡情况;采用蛋白质免疫印迹试验(Western?Blot)检测各组肝组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)的蛋白表达水平.结果 光镜下可见正常对照组肝细胞结构正常,排列整齐;THS模型组肝细胞肿胀、坏死;LPA预处理组肝细胞形态学变化较THS模型组明显减轻.THS模型组肝细胞凋亡较正常对照组明显增加,凋亡指数(AI)较正常对照组升高,caspase-3蛋白表达较正常对照组明显增加,ALT、AST、TBil水平较正常对照组明显升高,术后12?h达到峰值〔AI:(93.20±3.32)％比(3.44±1.32)％,caspase-3/3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH):0.46±0.02比0.13±0.01,ALT(U/L):75.81±7.10比20.83±2.72,AST(U/L):69.14±8.41比22.28±3.12,TBil(μmol/L):139.71±15.90比82.25±8.38,均P<0.05〕;LPA预处理组细胞凋亡较THS模型组明显减少,AI较THS模型组明显降低,caspase-3蛋白表达水平较THS模型组明显减少,ALT、AST、TBil水平较THS模型组明显降低,制模后1?h即出现统计学差异〔AI:(25.29±4.75)％比(45.69±10.70)％,caspase-3/GAPDH:0.17±0.01比0.26±0.02,ALT(U/L):28.36±9.60比49.21±9.49,AST(U/L):33.71±10.80比54.30±18.41,TBil(μmol/L):95.59±10.60比107.34±13.51,均P<0.05〕.结论 LPA可抑制THS大鼠肝细胞凋亡并改善肝功能.LPA有望成为治疗THS导致肝功能损害的潜在策略.