需肌醇酶1介导的内质网应激在暴发性肝功能衰竭肝细胞凋亡中的作用及其意义

摘要

目的探讨需肌醇酶1（IRE1）介导的内质网应激肝细胞凋亡途径在暴发性肝功能衰竭中的作用及意义。方法雄性Wistar大鼠共60只,暴发性肝功能衰竭模型组30只腹腔注射D-氨基半乳糖（D-GalN）+脂多糖（LPS）,对照组30只腹腔注射0.9%氯化钠溶液,应用流式细胞技术观察两组大鼠肝细胞凋亡情况,分别采用免疫组织化学法及RT PCR法动态观察肝组织中Caspase12、IRE1蛋白及mRNA表达情况。多个独立样本采用Kruskal-Wallis H检验,同一时间点两两比较采用Mann-Whitney U检验,相关性分析采用秩相关。结果模型组2、4、8和12 h肝细胞凋亡率随着给药时间延长呈上升趋势（χ~2=25.475,P＜0.01）,明显高于对照组（U=0,P＜0.01）;模型组随着给药时间的延长肝细胞胞质Caspase-12、IRE1α蛋白表达增多,对照组无表达;模型组Caspase-12、IRE1αmRNA表达随着给药时间的延长而增加,8 h达高峰,以后逐渐下降,各时间点的差异均有统计学意义（χ~2=23.983,χ~2=24.820;均P＜0.01）,明显高于对照组（U=0,P＜0.01）;IRE1与Caspase 12、细胞凋亡率均呈正相关（r=0.733,P＜0.01;r=0.715,P＜0.01）,Caspase-12与肝细胞凋亡率呈正相关（r=0.586,P＜0.01）。结论 IRE1介导的内质网应激肝细胞凋亡与暴发性肝功能衰竭的发生发展密切相关,早期干预内质网应激途径对防治肝功能衰竭可能具有保护作用。