人巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞对其细胞周期的影响

摘要

目的 研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast,HELF)后对其细胞周期的影响,探讨HCMV感染的发病机制.方法 用HCMV感染同步化的HELF作为感染组,同时设模拟感染组为对照组.用倒置相差显微镜观察两组细胞形态学变化至感染后7 d.于感染后12 h、24 h、48 h、72 h和96 h收获细胞,用免疫细胞化学法检测两组细胞核内HCMV IE1 72蛋白,流式细胞术检测细胞周期.结果 模拟感染组未见细胞形态学改变,亦未出现HCMV IE1 72蛋白阳性产物.感染组感染后72 h时即可见局部细胞变圆,膨胀,胞体及胞核巨大化,7 d时可见所有细胞均发生病变;免疫细胞化学检测显示,其各时间点的细胞均在核内出现呈棕黄色颗粒的HCMV IE1 72蛋白.模拟感染组在感染后12 h时有65.7%的细胞处于G1期,24 h时有43.8%的细胞处于G1期;感染组在感染后12 h时有70.4%的细胞处于G1期,24 h时有69.9%的细胞处于G1期;两两比较,差异均有显著性(均P<0.01).结论 HCMV感染HELF后在细胞核内进行复制、增殖,其影响了HELF周期,使大部分细胞停滞在G1 期.