人巨细胞病毒感染对人胚肺成纤维细胞自噬的影响

摘要

目的:研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对人胚肺成纤维(MRC-5)细胞自噬的影响。方法:用HCMV AD169株(MOI=1)感染MRC-5细胞,同时将未感染HCMV的MRC-5细胞设为空白对照组。分别在感染12、24、36、48和60 h后用蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白Beclin1和LC3蛋白以及m TOR信号通路下游磷酸化关键分子4E-BP-1-P和p70S6K-P的表达;应用荧光定量PCR检测HCMV DNA拷贝数;流式细胞仪定量检测吖啶橙荧光颗粒阳性细胞率。结果:在MRC-5细胞病毒感染组中,LC3和Beclin1蛋白表达水平均先升高再下降,与流式细胞仪检测结果一致;同时,4E-BP-1-P、p70S6K-P蛋白的表达水平先降低后升高;HCMV DNA拷贝数也是先增加后降低。而对照组中无相应分子变化。结论:HCMV感染MRC-5细胞后,在病毒增殖复制的早期(12~24 h内)可促进细胞发生自噬,晚期(24~60 h)则自噬受到抑制。其机制可能与m TOR信号通路有关,且自噬在一定程度上有利于促进HCMV在细胞中的复制增殖。