小鼠1, 2-DCE中毒性脑水肿形成过程中不同脑区CYP2E1表达水平及其对脑水肿形成的影响

摘要

目的研究1, 2-二氯乙烷（1, 2-dichloroethane, 1, 2-DCE）染毒过程中不同脑区细胞色素P450 2E1（cytochrome P-450 2E1, CYP2E1）表达的变化, 探讨CYP2E1对1, 2-DCE中毒引起的脑水肿形成的影响和作用。方法于2018年12月, 选择雌性SPF级昆明种小鼠40只随机分为对照组、染毒1、2和3 d组共4组, 每组10只。将染毒组小鼠置于100 L静式染毒柜中（5只/柜）, 以1.2 mg/L 1, 2-DCE每天吸入染毒3.5 h, 分别染毒1、2和3 d, 对照组不进行染毒, 其他处理方式与染毒组相同。分别于染毒结束后次日处死, 取脑组织并分区, 采用HE染色法对不同脑区进行组织病理学观察, 检测不同脑区丙二醛（malondialdehyde, MDA）、还原型谷胱甘肽（glutathione, GSH）含量和过氧化氢酶（catalase, CAT）活力;同时以蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测不同脑区中CYP2E1、occludin和claudin5蛋白含量, 再以实时荧光定量PCR法检测CYP2E1、occludin和claudin5 mRNA表达水平。实验数据采用SPSS 20.0进行统计分析, 多组组间比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA）, 组间两两比较采用SNK（q检验）法分析。结果与对照组比较, 染毒2 d和3 d组小鼠小脑组织出现明显的脑水肿改变;与对照组比较, 染毒3 d组小鼠小脑组织中MDA含量、CYP2E1蛋白和mRNA表达水平明显增高, 差异均有统计学意义（P＆0.05）;与对照组比较, 各个染毒组小鼠小脑组织中GSH含量、CAT活力及occludin和claudin5蛋白表达水平明显降低, 差异均有统计学意义（P＆0.05）。各组小鼠额叶皮质组织中上述指标差异均无统计学意义（P＆0.05）。结论 1, 2-DCE染毒可以诱导小鼠小脑组织中CYP2E1的表达增强, 引起脑组织氧化损伤和脑水肿, 对小鼠额叶皮质组织中CYP2E1的表达无明显影响。