青石棉诱导AL细胞CD59基因突变和DNA氧化损伤的研究

摘要

目的研究谷胱甘肽合成酶抑制剂buthionine sulfoximine(BSO)和自由基清除剂二甲亚砜(DMSO)对青石棉诱导人鼠杂交瘤(AL)细胞CD59基因突变率的影响以及青石棉引发细胞内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)产生的规律.方法细胞毒性、遗传毒性检测分别采用克隆法;8-OHdG检测采用ABC酶免疫染色法;非蛋白巯基化合物(NPSH)检测采用改进后的Tietze法.结果 25μmol/L BSO预处理AL细胞24 h后的细胞内NPSH含量降为2nmol/107细胞,仅为对照组的5%.青石棉单独处理组AL细胞CD59基因突变率为208±18.BSO预处理24 h后与青石棉继续共同孵育组细胞突变率可达到397±55,是青石棉单独处理组的2倍左右,差异有显著性(P＜0.05);而DMSO存在时,青石棉诱导的CD59基因突变率仅为57±8,比青石棉单独处理组降低72.6%.细胞内8-OHdG的产生随着青石棉处理剂量的增加而线性增加(y=150+20x,r=0.962 1).当青石棉处理剂量为6μg/cm2时,细胞内8-OHdG含量由对照组的137±9提高到289±6,是对照组的2倍以上.DMSO存在时,可使6μg/cm2石棉诱导的细胞内8-OHdG含量由289±6降低到170±3.结论自由基是青石棉诱导基因突变和DNA损伤过程中重要的调节物,具有剂量-效应关系.