PI3K抑制剂联合地塞米松改善氧化应激细胞模型对激素的敏感性及其分子机制

摘要

目的:研究PI3K抑制剂联合地塞米松对H2O2-TNFα-U937细胞模型激素敏感性的影响及其作用机制.方法:采用过氧化氢(H2O2)刺激巨噬细胞系U937,建立H2O2-TNFα-U937细胞氧化应激-激素耐受模型(简称H2O2-TNFα-U937细胞模型),将磷酸肌醇3激酶(PI3K)抑制剂(BEZ235或LY294002)单独或联合地塞米松(Dex)干预该模型.使用PCR与ELISA方法比较其抑制IL-8基因与蛋白质的表达水平,组蛋白去乙酰化酶(HDAC)-2试剂盒检测HDAC2活力改变,并通过Western blot检测AP-1、NF-κB磷酸化水平.结果:在H2O2-TNFα-U937细胞模型中,Dex抑制该细胞模型释放IL-8的能力降低,并且单用PI3K抑制剂(BEZ235或LY294002)不能明显抑制IL-8释放(P＜0.05),而经PI3K抑制剂(BEZ235或LY294002)联合Dex干预后细胞对激素的抵抗得到明显改善(P＜0.05).BEZ235而不是LY294002部分逆转了细胞核蛋白HDAC2的活力,但两种抑制剂均能相应降低炎症转录因子NF-κB、AP-1的磷酸化水平.结论:PI3K抑制剂联合Dex能改善氧化应激诱导的U937细胞对激素不敏感性,其机制可能与PI3K抑制剂能部分恢复因氧化应激作用导致的HADC2活力和降低NF-KB、AP-1蛋白磷酸化水平有关.