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上调miR-3表达对AGEs诱导的软骨细胞损伤的影响

     

摘要

目的:探讨上调miR-31表达对晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的软骨细胞凋亡、炎症反应和氧化应激的影响.方法:将体外培养的大鼠软骨细胞分为对照组、AGEs组、AGEs+miR-NC组和AGEs+miR-31组,采用RT-PCR法检测软骨细胞中miR-31表达,MTT法检测软骨细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,比色法检测细胞Caspase-3活性,Western blot检测细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达水平,试剂盒检测细胞上清液中炎症因子IL-1β、TNF-α和氧化应激因子SOD、MDA含量.结果:与对照组比较,AGEs组细胞存活率、细胞上清液中SOD含量和细胞中Bcl-2蛋白表达水平显著降低,而细胞上清液中IL-1β、TNF-α、MDA含量和细胞凋亡率、Caspase-3活性以及Bax蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与AGEs组比较,AGEs+miR-NC组中各指标无显著差异(P>0.05);与AGEs组或AGEs+miR-NC组比较,AGEs+miR-31组细胞存活率、细胞上清液中SOD含量和细胞中Bcl-2蛋白表达水平均显著升高,而细胞上清液中IL-1β、TNF-α、MDA含量、细胞凋亡率、Caspase-3活性以及Bax蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).结论:上调miR-31表达可通过抑制AGEs诱导的细胞凋亡、炎症反应和氧化应激起到保护软骨细胞损伤的作用.

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