Nrf2激动剂EGCG对糖尿病伤口愈合障碍的治疗作用研究

摘要

目的:建立糖尿病及糖尿病伤口愈合障碍动物模型,研究EGCG对糖尿病伤口愈合障碍的治疗作用,探讨相关的免疫学机制和分子生物学机制。方法:腹腔注射STZ,检测空腹血糖,建立糖尿病小鼠模型。高糖高脂饮食长期饲养,使其处于稳定的糖尿病状态。人工制造皮肤创口,动态观察伤口愈合率,建立糖尿病伤口愈合障碍动物模型。期间,按照分组要求,应用EGCG进行药物治疗,根据伤口愈合率研究治疗效果。治疗期满,取创面皮肤进行相关指标检测。应用Western blot技术检测Nrf2、HO-1、NQO1、ICAM-1、VCAM-1和Caspase12等蛋白质相对表达量;免疫组化技术检测3-NT;对各检测指标进行统计学分析,阐述EGCG治疗糖尿病伤口愈合障碍的作用机制。结果:糖尿病组伤口愈合率明显低于正常对照组(P<0.01),证明糖尿病伤口愈合障碍建模成功;糖尿病小鼠EGCG治疗组的伤口愈合率明显高于非治疗组(P<0.05)。糖尿病组的Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量均低于正常对照组(P<0.05);ICAM-1、VCAM-1和Caspase12等蛋白表达量均高于正常对照组(P<0.05)。糖尿病小鼠中,EGCG治疗组Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量均高于其非治疗组(P<0.05);ICAM-1、VCAM-1和Caspase12等蛋白表达量均低于其非治疗组(P<0.05)。免疫组化实验检测3-NT结果显示,糖尿病组3-NT阳性率明显高于Control组,证明糖尿病机体皮肤伤口处于较高水平的氧化应激状态。糖尿病小鼠EGCG治疗组3-NT阳性率明显少于其非治疗组(P<0.05)。结论:Nrf2是糖尿病并发症的关键保护性因子;上调机体Nrf2表达可有效减轻糖尿病并发症;EGCG作为Nrf2激动剂具有对抗糖尿病引起的氧化应激、炎症和细胞凋亡的作用,对DNHW有明显的治疗作用。